DIA 技术是目前主流的蛋白质组学定量技术，它采用DIA（Data Independent Acquisition，数据非依赖采集）技术进行数据采集，将整个质谱扫描质量范围分为若干小窗口，依次对每个窗口的所有离子进行碎裂，使其能够对扫描区间内的所有肽段离子进行高速一级 MS 扫描再进行二级 MS/MS 分析。因此，DIA 能够对复杂样品中几乎所有可检测的分子进行定量测定。DIA 综合了 shotgun proteomics 高通量检测的特点与精准定量分析的优势，是真正意义上的全景质谱检测手段。

DIA蛋白组学项目流程

技术流程

提取样品中总蛋白，取出一部分做蛋白浓度测定及 SDS-PAGE 检测，另取部分进行胰蛋白酶酶解，对酶解肽段除盐之后，对样品进行 LC-MS/MS 鉴定。LC-MS/MS 鉴定分为两个主要步骤，第一步采用传统的 DDA 方法建立蛋白谱图库，第二步采用 DIA 技术采集每个样品的质谱数据，在 DDA 数据库的基础上进行谱图匹配、定量信息的提取以及后续统计分析等。

技术优势

①全景扫描，数据覆盖度高；②样品种类不限，数量不限制；③重复性好，稳定性好，数据可回溯；④尤其适合大队列样本，血清样本；

数据分析